Reproduction : formation d’un nouvel organisme à partir d’un individu qui a atteint sa croissance optimale.

            = caractéristique fondamentale de tout être vivant car elle permet le maintient de l’espèce.

 

v La reproduction sexuée :

= brassage systématique des caractères héréditaires à chaque génération.

 

Elle se fait par l’intermédiaire de cellules spécialisées : les cellules sexuelles, dites germinales, ou aussi appelées gamètes.

Gamétogenèse : formation des gamètes faite par des cellules sexuelles matures hautement spécialisées et haploïdes. Elle est assurée par la méiose (1 phase de synthèse d’ADN pour 2 divisions) qui effectue un remaniement important de la morphologie des gamètes.

 

Une espèce donnée : un nombre donné de chromosomes de types différents (taille) = un nombre haploïde n.

            Exemple de l’Homme : 23 types (n=23)

-          cellules du soma = cellules somatiques

-          2 lots de chromosomes ® cellules diploïdes

2n = 46

                        44 autosomes (= 22 paires homologues),

                        + 2 hétérochromosomes.

Anisogamie : gamètes morphologiquement différents.

Isogamie : gamètes morphologiquement identiques.

 

Hermaphrodisme : présence de gamètes ♀ et ♂ chez un même individu.

-          hermaphrodisme simultané

-          hermaphrodisme successif (selon les cycles de développement)

¹ Gonochorisme : chaque type de gonade correspond à un individu différent.

 

Dimorphisme sexuel : différence morphologique entre les 2 sexes.

Fécondation : union des gamètes ♀ (ovocytes) et ♂ (spermatozoïdes)

            ® Fusion des 2 noyaux (amphimixie) = rétablissement de la diploïdie.

Zygote : à l’origine d’un nouvel individu pluricellulaire.

 

Lignée somatique (2n)                                    Différenciation cellulaire

Zygote (2n)

Lignée germinale (2n)

Gonade ♂ et ♀

Fécondation                  phase diplobiontique

    n ® 2n                   phase haplobiontique                            Méiose (® gamétogenèse)

   Gamètes ♂ et ♀

 

 

 

v Les invertébrés : de la multiplication asexuée à la reproduction sexuée :

 

Multiplication asexuée : permet à un organisme unique de produire des descendants sans le recourt des cellules sexuelles.

® absence de réorganisation génétique = mode conservatif du génome.

On la retrouve chez les Diploblastiques, les Triploblastiques acœlomates et cœlomates inférieurs (annélides polychètes et oligochètes, pas chez les achètes, mollusques, arthropodes et vertébrés)

 

Multiplication asexuée et reproduction sexuée alternées :

-          Soit avec les phases juvénile / adulte,

-          Soit en fonction de l’hôte parasité :         hôte I^aire ® reproduction sexuée,

-          Soit en fonction des conditions extérieurs

 

Ø  Les protozoaires : mitose binaire :

-          persistance de l’enveloppe nucléaire,

-          absence de fuseaux de division,

-          régénération des organites manquants.

 

Exemple des flagellés : division binaire longitudinale.

Exemple des ciliés : division binaire transversale.

            Paramécie :       2 noyaux :       Macronucléus (végétatif, polyploïde)

                                                                       très peu de gènes répétés beaucoup de fois

                                                           Micronucléus (sexuel, diploïde)

division équationnelle

Si les conditions sont défavorables, on observe un phénomène partiel de sexualité avec conjugaison (= réorganisation génétique par échange de micronoyaux)

 

§  Les sporozoaires (parasites) : mitoses multiples :

 

Exemple de Plasmodium falciparum (paludisme) :

            ® 2 phases :

 

-          Schizogonie : mitoses répétées sans division cellulaire ® formation d’un Schizonte

puis division du cytoplasme ® formation de Schizozoïdes

-          Gamogonie : formation de gamètes mâles ou femelles (= gamontes)

= phase de reproduction sexuée

 

                                               Schizonte

                                                                                                                      Schizozoïdes

            Sporozoïde                                            

      (n)                                                Cellules hépatiques                

Oocyste = corps en

rosette                 Glandes                              Hôte II :

                                          salivaires       Hôte I^aire :        Humain               Hématies

    Copula (2n)                                      Anophèle                                                         Méiozoïdes

    Cellules basales de l’épithélium intestinal

                                               Gamétocystes         Gamonte

 

 

 

 

 

Ø  Les métazoaires diploblastiques :

§  Les cnidaires :

Exemple de l’hydre :

 

·         La reproduction sexuée :

® espèce gonochorique ou hermaphrodite.

 

 

Ampoule testiculaire

                        Ectoderme

 

 

 

Spermatozoïde                                                           Cellules souches

 

                                                                       Endoderme

 

                 Spermatogenèse                                                                 Cellule nourricière

            (méiose + différenciation)

 

 

                                                                                                                                     Ovule

·         La reproduction asexuée :

® par bourgeonnement (= gemmiparité)

Elle est utilisée en fonction l’alimentation,

la température, le pH, etc.

                                                                                                               Ovogenèse

(Phagocytose

des cellules nourricières)

 

 

 

 

 

 

                                                                       ®        Détachement ou colonie temporaire

 

 

 

 

§  Les scyphozoaires :

= méduses, espèces gonochoriques

 

-          Phase asexuée, lors de la phase juvénile,

par strobilisation du polype (= clivage transversal)

-          Phase sexuée, lors de la phase adulte.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Ø  Les métazoaires triploblastiques acœlomates :

® multiplication asexuée assurée par scissiparité et régénération (= stolonisation)

 

§  Les platodes (= les planaires) :

= vers plats.

·         La multiplication asexuée :

Scissiparité et régénération :

-          cicatrisation,

-          destruction des organes,

-          organogenèse à partir de cellules souches.

 

 

 

 

Scissiparité                                         Régénération à partir

Transversale                                       de la région céphalique

 

                                                                                   Régénération à partir

                                                                                  de la région caudale

 

 

 

·         La reproduction sexuée :

= hermaphrodisme simultané à fécondation croisée.

 

® début d’organisation interne d’un tractus génital.

 

Cf. poly de Biologie Animale : schéma de l’appareil génital.

 

Ø  Les triploblastiques cœlomates primitifs :

§  L’exemple des polychètes :

·         La reproduction sexuée :

                                   ® gonochorisme.

 

Ici, on observe une absence de gonades différentiables,

ce n’est qu’un amas cellulaire.

 

Les gamètes sont libérés dans la cavité cœlomique et excrétés à l’extérieur via les néphridies à néphrostomes ciliés.

·         La multiplication sexuée :

-          Soit par stolonisation par scissiparité simple :

 

Tête

 

Tronc

 

 

Pygidium

acéphale

 

 

 

-          Soit par stolonisation architomique :

 

Tête

 

Tronc

 

 

Pygidium

 

 

 

 

-          Soit par stolonisation paratomique :

 

Tête

 

Tronc

 

 

Pygidium                                Préformation

                                               de la tête

 

 

 

 

v Conclusion :

 

La multiplication asexuelle est une phase essentielle du cycle biologique (aussi dite juvénile)

Elle permet la colonisation rapide d’un milieu stable, ainsi que l’obtention de clones (= inconvénient)

 

La sexualité participe à l’adaptation et la survie de l’espèce (= brassage génétique)

Au cours de l’évolution, on observe la perte progressive de l’aptitude à la multiplication asexuée et la capacité de régénération.

 

 

 

v L’anatomie des tractus mâles et femelles :

Ø  Le tractus génital mâle :

4 parties essentielles, chacune ayant une fonction particulière.

 

§  Les testicules (=gonades) :

Situés dans le scrotum

2 fonctions :

-          Spermatogenèse = fonction exocrine,

-          Synthèse d’hormones sexuelles (= stéroïdes sexuels) à partir de cholestérol comme la testostérone = fonction endocrine.

2 compartiments :

-          Les tubes séminifères,

-          Les tissus interstitiels (synthèse en partie des hormones sexuelles)

 

§  Le système de canaux :

·         Les canaux efférents (au nombre de 12) :

= relais entre le Rete Testis et l’épididyme.

Ils assurent le transport des spermatozoïdes (dans le fluide testiculaire) Le fluide testiculaire débute au tube séminifère, passe au Rete Testis et arrive aux canaux efférents.

 

·         L’épididyme (long et flexueux) :

= cellules épithéliales et muscles lisses.

3 parties :

-          La tête (le plus proche des testicules),

-          Le corps (acquisition de la mobilité des spermatozoïdes),

-          La partie caudale (stockage des spermatozoïdes)

 

·         Le canal déférent (au nombre d’un seul) :

Il s’élargit pour donner les ampoules séminales (stockage)

 

∆ à ne pas confondre avec les vésicules séminales !

 

§  2 glandes endocrines :

·         Les vésicules (ou glandes) séminales :

= cellules épithéliales

Elles sécrètent un milieu alcalin nutritif (fructose, fibrinogènes, vitamine C, prostaglandine)

Développement :

                                               Ex. : singes et rongeurs.

                                              

Ex. : homme et lagomorphes.

                                              

Ex. : monotrèmes, marsupiaux, carnivores et cétacés.

·         La prostate :

Elle est présente chez pratiquement tous les mammifères.

Elle entoure l’urètre et est constituée :

-          de lobules glandulaires,

-          d’un milieu acide (acide citrique),

-          d’enzymes hydrolytiques (fibrinolysine),

-          de polyamines (spermine, spermidine)

 

Le liquide séminal = sécrétion des vésicules séminales + sécrétion de la prostate.

Le sperme = liquide séminal + spermatozoïdes.

 

Composition séquentielle de l’éjaculat :

-          sécrétion prostatique (permet de mieux liquéfier le mélange),

-          spermatozoïdes + sécrétion de l’épididyme,

-          sécrétion des vésicules séminales,

-          et, pour les rongeurs et les équidés, un bouchon vaginal sécrété par les glandes coagulantes.

 

 

§  Les glandes bulbo – urétrales (ou glandes de Cowper) :

Elles sécrètent un liquide clair pour lubrifier l’urètre.

Développement :

                                               Ex. : rongeurs, éléphants, ongulés (étalon)

                                              

Ex. : homme.

                                              

Ex. : certains carnivores et cétacés.

 

 

Ø  Le tractus génital femelle :

§  Ses fonctions :

-          Production de gamètes femelles = ovogenèse,

-          Accueil des spermatozoïdes,

-          Création d’un environnement approprié à la fécondation de l’ovule,

-          Création d’un environnement approprié au développement du fœtus,

-          Expulsion du fœtus à maturité.

 

§  Les ovaires :

2 fonctions :

-          Ovogenèse = fonction exocrine,

-          Synthèse d’hormones sexuelles à partir de cholestérol comme la progestérone (P₄) et l’oestradiol (E₂) = fonction endocrine.

 

Chez les mammifères, les ovules sont libérés de manière cyclique. Pour la femme et le singe, il s’agit d’un cycle menstruel ; sur lequel l’ovaire calque son cycle, dit oestrien.

                            Oestradiol                       Oestrus               Progestérone (+ oestradiol chez la femme)

 

  J –14                 Pro-oestrus                         J 0                           Dioestrus                                J +14

                                                           = ovulation provoquée

                                                   par des hormones gonadotropes

 

Oestrus : période d’acceptation du mâle.

Anoestrus : période de repos sexuel.

 

Le cycle menstruel est basé sur les modifications de l’utérus (menstruation)

 

     J 0                  J +5                                    J +14                                                           J +28

      Menstruation   Prolifération des cellules                         Phase lutéale

                                   de l’endomètre                           (Synthèse de glycogène)

                   Croissance folliculaire          Ovulation

 

§  Les trompes de Fallope (= oviductes) :

 

Fonctions :

-          Récupération de l’ovule,

-          Lieu de la fécondation de l’ovule,

-          Transport de l’ovule ou de l’œuf,

-          Développement précoce de l’œuf.

 

Son épithélium est constitué de cellules à mucus et de cellules ciliées.

 

§  L’utérus :

= lieu de l’implantation.

 

Fonctions :

-          Transport et capacitation des spermatozoïdes (= acquisition de pouvoir fécondant),

-          Contrôle du corps jaune (lutéolyse = dégradation du corps jaune),

-          Implantation (= nidation), placentation (= développement du placenta) et gestation,

-          Parturition (= contraction du myomètre permettant l’expulsion du juvénile)

+ involution post partum (= régression après la parturition)

 

Myomètre : musculature lisse.

Endomètre : muqueuse (glandes)  "  Épithélium (modifications cycliques)

Primate :                                                                                                       : Ongulé

 

 

                                                                                                                        Cornes utérines

 

 

 

 

 

 

 

§  Le col de l’utérus :

= cervix

 

Fonctions :

-          Transport du sperme, réservoir (= cryptes ou poches cervicales)

-          Sélection et survie des spermatozoïdes (glaire, modifications cycliques)

-          Parturition (= dilatation)

 

§  Le vagin :

= organe de la copulation.

 

-          Il permet le transport du sperme. C’est un milieu acide (pH 5,7) tamponné par le liquide séminal qui est alcalin.

-          L’épithélium est pavimenteux et présente des variations cycliques (kératinisation)

 

 

v La gamétogenèse :

Ø  La méiose dans la gamétogenèse :

 

Spermatogenèse : processus de différenciation des cellules germinales, souches diploïdes (spermatogonies) en spermatozoïdes haploïdes.

Ovogenèse : processus de différenciation d’une ovogonie diploïde en ovotide haploïde.

 

            Spermatogenèse                                                                    Ovogenèse                 

2C, 2N

Spermatogonie                       /                                                         Ovogonie

 

 

 

4C, 2N

Spermatocyte I^AIRE                 /                      Ovocyte I^AIRE

 

 

2C, N 

Spermatocyte II^AIRE / Ovocyte II^AIRE                                                 Émission

                                     du 1^er globule polaire

 

C, N

Spermatide ronde / Ovotide

 

Spermiogenèse                                                                                                     Émission

Spermatide allongée = spermatozoïde                                                          du 2^ème globule polaire

 

Spermatogenèse : méiose symétrique

            1 spermatocyte  ®  4 spermatides.

Ovogenèse : méiose asymétrique

            1 ovocyte  ®  1 ovotide.        

 

Ø  La spermatogenèse :

§  La phase de prolifération mitotique des spermatogonies :

 

Exemple du rat : 5 mitoses successives avec une cytodiérèse incomplète (passage d’informations par des ponts cytoplasmiques)

 

Spermatogonie A1     ®        A2       ®        A3       ®        A4       ®        In        ®        B

            Nb =    1                     2                     4                     16                    32                    64

 

§  La phase méiotique :

 

Spermatogonie B        ®        Spermatocyte I ^AIRE

 

·         Prophase I :

 

-          Spermatocyte I ^AIRE pré leptotène : synthèse de l’ADN,

-          Spermatocyte I ^AIRE leptotène : 4C, 2N (chromosomes bivalents),

-          Spermatocyte I ^AIRE zygotène : appariement des chromosomes

® tétrade via le complexe synaptonémal,

-          Spermatocyte I ^AIRE pachytène : synthèse protéique (= croissance),

-          Spermatocyte I ^AIRE diplotène : chiasmas (= reflets visibles des crossing-over)

 

·         Métaphase I :

 

Spermatocyte I ^AIRE      ®        Spermatocyte II ^AIRE    (2C, 1N)

 

·         Métaphase II :

 

Spermatocyte II ^AIRE    ®        Spermatide     (1C, 1N)

 

§  La spermiogenèse :

= métamorphose des jeunes spermatides rondes en spermatides allongée.

 

(les étapes suivantes sont simultanées)

 

·         La formation de l’acrosome :

 

-          Migration de l’appareil de Golgi vers le pôle apical,

-          Fusion des vésicules golgiennes pour former la vésicule acrosomique (qui s’étale sur la partie antérieure du noyau)

 

·         La réorganisation et l’allongement du noyau :

 

-          Condensation importante de la chromatide via le remplacement des histones par des protamines,

® Arrêt de la transcription des gènes.

 

·         L’assemblage de flagelle :

 

-          Migration des 2 centrioles vers la région postérieure du noyau et positionnement :

-          1^er centriole (= centriole proximal) 

® position perpendiculaire à l’axe de la spermatide.

-          2^nd centriole (= centriole distal)

® position parallèle à l’axe de la spermatide,

+ allongement des microtubules.

® Complexe axonémal du flagelle.

 

·         La réorganisation et l’élimination d’une partie du cytoplasme :

 

-          Migration des mitochondries vers la partie postérieure du noyau et formation d’une spirale autour du complexe axonémal (= manchon mitochondrial),

-          Élimination du cytoplasme excédentaire

® Corps résiduels phagocytés par les cellules de Sertoli.

 

 

§  La spermiation :

= Libération des spermatides matures dans la lumière du tube séminifères et transformation en spermatozoïdes.

 

Espèce :	Durée de la spermatogenèse (en jours) :	Nb. Spermatozoïdes par éjaculat (106) :	Nb. Spermatozoïdes par ampoule de l’oviducte :
Souris	34.6	50	Inf. à 100
Hamster	35	80	2.550
Rat	53.2	58	200
Lapin	51.8	290	250 à 500
Chien	54.4	18.800	…
Singes	45 à 70	400 (pour Rhésus)	…
Verrat	34	…	…
Homme	74	280	200

 

§  Les anomalies de la spermatogenèse :

 

-          Paramètres :         V = 2 à 6 mL,

pH = 7,2 à 7,8

% de formes mobiles (= mobilité)

% de formes vivantes (= viabilité)

Numération (nombre de spermatozoïdes par éjaculat)

Morphologie

-          Anomalie du nombre :                 Azoospermie (n = 0)

Oligospermie (n inf. à 50.10⁶)

-          Trouble de mobilité :                   Asthénospermie (mobilité inf. à 40%)

-          Anomalie morphologique :          Tératospermie (morphologie normale inf. à 30%)

 

§  Organisation fonctionnelle du testicule :

 

2 fonctions : production des spermatozoïdes et synthèse des stéroïdes sexuels.

2 compartiments : interstitiel et tubulaire (= tubes séminifères)

                                  

 

                                   Lumière du tube séminifère

                                               Tube séminifère :          Cellules germinales,

                                                                                  + Cellules de Sertoli,

                                                                                  + Péritubulaires myoïdes (= contractiles)

 

 

 

Interstitiel = espace entre les tubes séminifères :          Tissu conjonctif,

                                                                                  + Vaisseaux sanguins,

                                                                                  + Vaisseaux lymphatiques,

                                                                                  + Nerfs,

                                                                                  + Cellules de Leydig (synthèse des androgènes)

                                                                                  + Macrophages.

Les cellules de Sertoli :

Elles sont les cellules nourricières des cellules germinales, elles participent à l’architecture des tubes séminifères. Elles ont aussi pour rôle la production :

-          du fluide testiculaire nécessaire aux transport des spermatozoïdes,

-          des facteurs de croissance (comme la TGF – b),

-          des protéines de transport qui lui sont propres (comme Androgen Binding Protein ou la Transferrine qui transporte le fer à la place de la Ferridine sanguine),

-          et des métabolites énergétiques (comme le lactate et le pyruvate)

Les cellules germinales sont intercalées entre les cellules de Sertoli.

Leur forme :

Elles présentent un noyau irrégulier avec un nucléole bien marqué et sont reliées entre elles par des jonctions serrées. Elles forment ainsi la barrière hématotesticulaire.

Cette barrière :           – empêche le passage de macromolécules de l’interstitiel vers le compartiment ad-luminal du tube séminifère,

– forme un microenvironnement propice au développement des cellules germinales haploïdes,

– et protège des corps étrangers.

 

§  Régulation hormonale de la fonction testiculaire :

= régulation endocrine (= sous contrôle des hormones de l’hypophyse)

 

                             Sécrétion dans le sang d’une hormone

      Glande     

(tissu spécialise)                                                          Transport par le sang

                                                          

 

Cellule cible

(éloignée du lieu de synthèse)

 

·         Organisation de l’hypophyse :

Elle est située à la base du cerveau (un peu à part), dans une petite cavité osseuse (= os sphénoïde)

sous le 3^ème ventricule (ou lobe)

 

 

-       Le lobe postérieur, appelé aussi neurohypophyse, est le prolongement des axones de l’éminence médiane.

" Il correspond donc à la structure nerveuse.

 

-       Le lobe antérieur, appelé aussi andénohypophyse, est composé de cellules sécrétrices.

 

 

L’hypophyse est contrôlé par l’hypothalamus :

 

Neurones de l’hypothalamus

$

Sécrétion de GnRH (gonadolibérine)

$

Système porte

$

Excitation de l’adénohypophyse

$

Sécrétion hormonale gonadotropes :

-          LH : hormone lutéinisante,

-          FSH : hormone folliculo–stimulante

$

Circulation sanguine

 

 

 

 

 

 

 

 

 

·         Action des hormones gonadotropes sur le testicule :

 

 

 

 

   Rétrocontrôle

de la testostérone                          GnRH

 

 

 

 

                                                      LH et FSH

 

                                                Circulation sanguine

                                           (" régulation endocrine)

 

 

                                          LH                                          FSH

 

 

 

 

                                                                                         Récepteur (nucléaire) aux androgènes

 

 

                               Testostérone

 

 

                                                                                                             Facteur de croissance

Ø  La stéroïdogenèse :

Les stéroïdes sont des hormones lipidiques et sont obtenus à partir du cholestérol.

 

                                                                                                                 Chaîne latérale

 

 

 

 

 

 

        

 

Fonction alcool                              Double liaison

 

" Passage dans les crêtes dans les mitochondries et transformation avec le P450 (cytochrome = hème comportant un Fe)  et le SCC (enzyme de clivage de la chaîne latérale du cholestérol)

Le cholestérol devient du prégnénolone et entre dans le REL (réticulum endoplasmique lisse)

 

Ensuite, l’enzyme 3b–HSD (hydroxy_stéroïde déshydrogénase) catalyse la transformation du prégnénolone en progestérone (du groupe des prostagènes)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Fonction cétone

 

Le progestérone va ensuite se transformer en testostérone (du groupe des androgènes)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

La testostérone va ensuite être transformée :

-          Soit en 5a_dihydrotestosérone (5a_DHT) par la 5a–réducase,

-          Soit en oestradiol (du groupe des oestrogènes) par la P450–aromatase.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Ø  Ovogenèse et folliculogenèse :

§  Blocage de la méiose de l’ovocyte :

 

À la vie fœtale :

 

-          Mitoses des ovogonies (entre 2 et 5 mois),

-          Début de la prophase I (qui donne l’ovocyte I),

-          Arrêt au stade diplotène avant la naissance.

 

À la puberté :

 

-          Reprise de la méiose avant l’ovulation,

-          Nouveau blocage au stade métaphase II,

 

À la fécondation :

 

-          Fin de la méiose.

 

2C, 2N

Ovogonie

 

Mitoses

 

 

Phase S

 

                                                                      Naissance

Croissance

4C, 2N

Ovocyte I^AIRE

                                                                      Puberté (ovulation)

Division I de Méiose

 

2C, N

Ovocyte II^AIRE                                          Émission

du 1^er globule polaire

 

                                                                      Fécondation

Division II de Méiose

C, N

                                               Ovotide (œuf)

                                                                                                                Émission

                                                                                                          du 2^ème globule polaire

 

§  Folliculogenèse :

 

Les ovogonies et les ovocytes sont associés à des cellules somatiques (cellules folliculaires) pour former des follicules.

 

"  Évolution des cellules somatiques au sein d’un même follicule au cours de la folliculogenèse :

 

-          Follicule primordial :

  Ovocyte I^AIRE  (30 µm)

+ 1 couche de cellules folliculaires fusiformes.

 

 

 

-          Follicule primaire :

 

  Ovocyte I^AIRE bloqué en diplotène  (50 µm)

+ 1 couche de cellules folliculaires cubiques.

 

                                   "  Début de l’accumulation des réserves vitellines (dans le cytoplasme)

 

 

-          Follicule secondaire (300 µm) :

 

 

Noyau de l’ovocyte

   Zone pellucide (= fluide de glycoprotéines)

Ovocyte

                                                                                      Granulosa

Membrane plasmique

       Membrane basale

 

                                          Thèque (cellules allongées)

 

"  Différenciation des cellules folliculaires en :

-          Cellules de la granulosa (une dizaine de couche),

-          Cellules de la thèque.

 

-          Follicule tertiaire (4 mm) :

 

 

 

         Zone pellucide

    Ovocyte

       (150 µm)                                                                      Granulosa (qui continue à proliférer)

 

Antrum                                                                       Thèque interne (cellules parallèles

       (= cavité)                                                                     à la surface du follicule)

       

                                                                   Thèque externe

 

 

"  Apparition de la cavité folliculaire à partir des cellules de la granulosa qui sécrètent un fluide folliculaire et un fluide d’oestradiol.

 

"  Différenciation de la thèque en :

-          Thèque interne (lieu de synthèse d’androgènes),

-          Thèque externe.

-          Follicule mature (ou follicule de De–Graaf) (2 cm) :

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

"  Une seule cavité : l’antrum.

"  Ovocyte II^AIRE excentré dans la zone de la granulosa (= cumulus oosphorus) et entouré d’une couche de cellules de la granulosa (= corona radiata)

 

Follicules primordiaux

   Follicules primaires

 

Naissance                    Initiation

 

                                                Atrésie

Follicules secondaires

 

Puberté                      Croissance                              Phase folliculaire

 

 

Follicules tertiaires

 

                        Maturation

 

 

                   Follicule de De–Graaf

 

            Ovulation                               Lutéinisation              Phase lutéale

 

                   Ovule              Corps jaune

 

Atrésie :  Dégénérescence de follicule                      Au 5^ème mois de la gestation, l’embryon présente 7.10⁶ follicules primordiaux. À la naissance, il n’y a plus que 2.10⁶.

" Au bout du compte, il n’y aura eu qu’environ 400 ovulation entre la puberté et la ménopause.

 

-          Ovulation :

 

-          Dissociation des cellules du cumulus oophorus,

-          Expulsion dans la cavité péritonéale de l’ovocyte II^AIRE accompagné des cellules de la corona radiata (= ovule),

-          Transformation des cellules de la granulosa et de la thèque interne en cellules lutéale (= formation du corps jaune) qui vont synthétiser de la progestérone.

 

Le corps jaune est maintenu pendant la phase lutéale. S’il y a fécondation, il devient le corps jaune de gestation.

 

Ø  Contrôle hormonal de la folliculogenèse :

§  Niveaux hormonaux :

 

À chaque cycle, 1 follicule II^AIRE ou 2 (chez la femme) devient un follicule III^AIRE puis un follicule de De–Graaf (croissance et maturation)

 

Cela entraîne une augmentation de la synthèse d’oestradiol qui présente un rétrocontrôle négatif puis positif sur la sécrétion de LH et FSH.

 

" Il y a donc un pic plasmatique de LH et FSH qui entraîne l’ovulation accompagnée la lutéinisation (= formation des cellules lutéales)

 

Les cellules lutéales sécrètent de la progestérone et d’oestradiol qui effectuent un rétrocontrôle sur l’hypothalamus et l’hypophyse.

 

 

§  Régulation endocrine :

 

Phase folliculaire :

 

 

 

                                                      GnRH

 

 

 

 

 

 

      

                                                                                                     Oestradiol (E2)

                                                  LH                FSH

 

Phase lutéale :

 

 

 

                                                      GnRH

 

 

 

 

 

 

                                                       LH       FSH

 

                                                                                         Oestradiol

                                                                                         Progestérone

 

 

Juste avant l’ovulation, les cellules de la granulosa expriment les récepteurs de la LH et sont régulées par la LH et la FSH.

 

§  Conséquences du pic de LH sur les cellules de la granulosa :

 

-          Synthèse de protéases :

"  Dissociation des cellules du cumulus oosphorus

"  Fragilisation de la lame basale et de la thèque interne

 

-          Synthèse de prostaglandines (PGE2a et PGF2) :

"  Contraction de l’ovaire

"  Ovulation

 

-          Baisse de la synthèse d’ostradiol E2

 

-          Expression du récepteur à la prolactine (hormone de l’hypophyse antérieure)

"  Synthèse de la progestérone (= action lutéotrope)

"  Transformation des cellules de la granulosa et de la thèque interne en cellules lutéales (= lutéinisation)

 

-          Reprise de la méiose :

"  Levée d’inhibition

"  Activation du MPF (= facteur du promoteur de la méiose)

 

Granulosa                                    Ovocyte

 

                                                                  OMI                = inhibiteur ovarien de la maturation

 

                                                                  Méiose

 

 

 

 

 

                                                     

                   Zone pellucide             Jonction ouverte                    

 

 

La LH entraîne la fermeture

       des jonctions ouvertes.

                                                                                                                 Méiose

 

 

 

                                                                                                                    MFP

 

 

                                                                                Hormone de maturation

 

§  Lutéinisation = formation du corps jaune :

 

Conséquence de la synthèse de progestérone (ou d’oestradiol selon les espèces) par le corps jaune :

-          Rétrocontrôle négatif sur la libération de LH et de FSH,

 

-          Modification du tractus :

-          Utérus  "  prolifération de l’endomètre

-          Vagin  "  synthèse du glycogène par les cellules épithéliales

(protection de l’acide lactique des bactéries commensables)

-          Col de l’utérus  "  synthèse de mucus servant à la capacitation des spermatozoïdes

et à la formation d’un bouchon protecteur.

 

 

S’il y a une absence de fécondation, il y a la synthèse d’oxytoxine par le corps jaune entraînant la synthèse de PGF2a par l’endomètre.

 

"  Il y a donc la lutéolyse du corps jaune et la reprise du cycle.

S’il y a une fécondation, le blastocyste s’implante durant le 6^ème jour post–fécondation (pour la femme)

"  Il y a donc le développement du placenta, la synthèse d’hormone hCG (= hormone gonadotrope chorionique humaine) et le maintient du corps jaune de gestation.

Phase folliculaire :

 

Il y a un rétrocontrôle négatif sur l’hypophyse et sur l’hypothalamus. Ce rétrocontrôle devient ensuite positif entraînant :

-          Un pic de LH et de FSH,

-          Une légère augmentation de la progestérone,

-          Et une importante augmentation d’œstrogène.

 

Phase lutéale :

 

Il y a la sécrétion de prolactine.

 

v Fécondation :

 

Il s’agit de la fusion de l’ovocyte II^AIRE et d’un spermatozoïde. Elle entraîne la fin de la méiose, l’amphimixie des pronucléi (diploïdie) et le début du développement.

 

Ø  Maturation et capacitation du spermatozoïde :

 

Dans le corps de l’épididyme, le spermatozoïde acquiert sa mobilité (= maturation)

Dans les voies génitales femelles, il y a la capacitation où le spermatozoïde acquiert la possibilité d’effectuer la réaction acrosomique.

 

Le tractus femelle présente des fluides et des enzymes qui entraînent

-          L’élimination des glycoprotéines du fluide séminal,

-          La modification de la membrane du spermatozoïde,

-          Diminution des charges négatives de surface,

-          Et modification des lipides membranaires.

-          Et l’hyper–activation du spermatozoïde (augmentation de l’amplitude de mouvement)

 

Ø  Étapes de la fécondation :

§  Interaction entre le spermatozoïde et l’ovule :

 

-          Franchissement de la corona radiata :

-          Spermatozoïde  "  activité hyaluronidase,

"  Digestion de l’acide hyaluronique de la matrice extra–cellulaire (MEC)

 

-          Liaison du spermatozoïde à la zone pellucide (= gel de glycoprotéines ZP1, ZP2, ZP3, etc.)

 

-          Réaction acrosomique :

-          Fusion partielle entre la membrane plasmique et la membrane externe de l’acrosome                  "  pores,

-          Libération du contenu acrosomique par les protéases,

"  Digestion de la zone pellucide,

"  Le spermatozoïde est au contact de la membrane plasmique de l’ovocyte.

-          Fusion de la membrane interne de l’acrosome avec la membrane de la région caudale (du spermatozoïde)

 

 

-          Contact entre le spermatozoïde et la membrane plasmique de l’ovocyte II^AIRE qui déclenche la réaction corticale (= blocage de la polyspermie)

 

-          Libération du contenu enzymatique des granules corticales, ce qui empêche la fixation d’autres spermatozoïdes (" formation d’une barrière entre la zone pellucide et les autres spermatozoïdes)

 

-          Positionnement tangentielle du spermatozoïde et la fusion des membranes plasmiques

 

-          Interactions de protéines : fertiline (spermatozoïde) et intégrine (ovocyte II^AIRE)

 

Le processus de pénétration des spermatozoïde est différent selon les espèces.

 

§  Activation ovocytaire = fin de la méiose :

 

 

L’entrée du spermatozoïde entraîne l’augmentation brutale du taux de Ca²⁺ dans l’ovocyte II^AIRE entraînant des oscillations calciques (un ou plusieurs pics selon les espèces)

 

" Cette modification biochimique déclanche la reprise et la fin de la méiose.

 

 

 

Le système urogénital est constitué par l’organe urinaire et l’organe reproducteur. Ces derniers ont la même origine embryonnaire.

 

"  Les canaux génitaux dérivent des canaux excréteurs et des reins primitifs.

 

v Développement du système urinaire (humain) :

 

Le système urinaire est constitué de 2 reins, 2 uretères, 1 vessie et 1 urètre.

Il est dû à la différenciation du mésoderme intermédiaire (de la région céphalique vers la région caudale)

 

Il y a la mise en place successive de 3 reins :

-          Pronéphros (rein non fonctionnel chez les vertébrés supérieurs),

-          Mésonéphros (rein fonctionnel),

-          Métanéphros (rein fonctionnel)

 

Devenir de ces 3 reins chez les vertébrés supérieurs :

-          Pronéphros : médulla des surrénales,

-          Mésonéphros : gonade,

-          Métanéphros : rein définitif

 

 

Ø  Pronéphros :

 

Il apparaît à la 4^ème semaine dans la région cervicale (antérieure)

 

Il est constitué de néphrons avec un entonnoir cilié, ouvert sur la cavité cœlomique. Il présente, en plus, des glomérules externes (vaisseaux sanguins)

Les tubes néphrotiques débouchent sur un canal unique (= uretère primaire)

 

Chez l’Homme, il est non fonctionnel et se résorbe rapidement. Chez les autres mammifères, il est fonctionnel.

 

Ø  Mésonéphros :

 

Il s’étend vers la partie caudale. Les tubes néphrotiques sont associés à une glomérule interne et débouchent sur l’uretère I^AIRE (= canal de Wolff) qui, lui–même, débouche dans le cloaque.

 

" Le cloaque correspond à la région commune où débouchent les canaux urogénital et intestinal.

 

Le mésonéphros est le rein définitif chez les poissons et les amphibiens ; il se résorbe chez les reptiles, les oiseaux et les mammifères.

 

Ø  Canal de Müller :

 

Il se développe après la résorption du pronéphros, à partir d’une invagination de l’épithélium cœlomique vers la partie caudale (parallèlement au canal de Wolff)

 

Il est ouvert sur la cavité cœlomique (ou abdominale) par un entonnoir.

 

-          Le canal de Wolff se différencie en tractus mâle.

-          Le canal de Müller se différencie an tractus femelle.

 

Ø  Métanéphros :

 

Il apparaît à la 5^ème semaine, à partir des cellules mésenchymateuse (blastème métanéphrogène)

 

Il se connecte au canal de Wolff par un bourgeonnement urétéral.

 

       Canal de Wolff

 

 

                                                      Développement du

                                                               bourgeon

 

                                          Blastème

 

 

Bourgeon urétéral                                                                        Développement du mésenchyme et continuation du développement et ramification du bourgeon

 

                               Bassinet

                                                                                   Tubes rénaux en formation

 

 

                                                                          Mésenchyme

      

                               Calice

 

                   Tube collecteur

                   Ramification du tube collecteur et différenciation du mésenchyme

 

 

                               Tube contourné proximal                                                      Glomérule

 

 

                              

                                                                                                                   Capsule de Boxman

Tube collecteur     

                                                                                         Tube contourné distal

 

                               Anse de Henlé

 

v Différenciation sexuelle :

 

X Y                              X X

 

                                          Fécondation  "  établissement du sexe génétique

 

                                          Embryon

 

                         Stade indifférencié

 

                                           Différenciation

 

                     ♂                       ♀

 

Ø  Développement des gonades et des conduits génitaux :

§  Stade indifférencié :

 

Les gonades sont constituées de cellules somatiques et de cellules germinales.

 

Les cellules germinales (CG) ont comme origine les cellules germinales primordiales (CGP) au niveau de l’embryon.

Les cellules somatiques ont comme origine les crêtes génitales constituées de l’épithélium cœlomique et du mésenchyme du mésoderme intermédiaire.

 

 

Il y a :

-          Migration des cellules germinales primordiales localisées dans la partie caudale du lécithocœle I^AIRE, à proximité de l’allantoïde,

 

-          Prolifération des cellules somatiques et des cellules germinales primordiales,

 

-          Association de ces cellules formant ainsi des cordons sexuels I^AIRES.

 

"  À ce stade, on a un gonocyte. Les canaux sont indifférenciés :

-          Le canal de Wolff apparaît à la 4^ème semaine,

-          Le canal de Müller se forme durant la 6^ème semaine.

 

§  Différenciation mâle :

 

Différenciation des testicules :                                                     entre la 7^ème et la 20^ème semaine

 

Les cordons sexuels vont se développer au centre de la gonade (médulla), formant ainsi les cordons testiculaires.

Ces derniers sont constitués de cellules de Sertoli et de spermatogonies.

 

Différenciation des cellules de Leydig :

 

Elle se fait entre les cordons testiculaires (milieu interstitiel)

Les cellules de Leydig vont ensuite produire la testostérone.

 

Les cordons testiculaires sont reliés au rete testis (qui provient des connexions urogénitales)

 

Développement de l’albuginée :

 

Il amène à la formation du tractus mâle et commence à la 8^ème semaine.

 

-          Différenciation des canaux de Wolff en :

-          Épididyme,

-          Canaux efférents,

-          Canaux déférents et vésicules séminales

(sous l’action de la DHT = dihydroxytestostérone)

 

-          Régression des canaux de Müller sous l’action de l’hormone AMH produite par les cellules de Sertoli fœtales.

 

 

§  Différenciation femelle :

 

Différenciation de l’ovaire :                            à la 8^ème semaine (un peu plus tard que pour le mâle)

 

-          Disparition des cordons sexuels I^AIRES au centre de la gonade

"  médulla

-          Maintien des cordons sexuels I^AIRES à la périphérie

"  zone corticale de l’ovaire

-          Association des cellules somatiques et des ovogonies

"  cordons de Valentin – Pflüger

À la 15^ème semaine, les ovogonies et les cellules folliculaires s’associent pour former les follicules primordiaux.

 

 

Organisation des canaux :                                                                                   à la 9^ème semaine

 

-          Régression des tubes du mésonéphros

 

-          Régression des connexions urogénitales

"  Rete ovarii

-          Régression des canaux de Wolff

"  épophore résiduel

-          Différenciation des canaux de Müller en :

-          Pavillon ouvert sur la cavité péritonéale,

-          Trompes de Fallope,

-          Cornes utérines (qui fusionnent à leur base pour donner l’utérus),

-          Partie supérieure du vagin (= bourgeon entoblastique à l’origine de la partie supérieure.

 

Ø  Développement du sinus urogénital :

§  Stade indifférencié :

 

De la 4^ème à la 5^ème semaine :

 

La division du cloaque se fait à partir du bourgeon entoblastique et forme la cloison entoblastique (= tissu conjonctif fibreux)

 

De la 5^ème à la 8^ème semaine :

 

Il y a :

-          Séparation du cloaque en rectum et sinus génital par le développement du mésenchyme (= périnée)

 

-          Dilatation de la partie distale du canal de Wolff, entraînant la séparation progressive de l’uretère

 

À la 8^ème semaine :

 

Le canal de Müller se connecte.

 

§  Différenciation du sinus urogénital mâle :

 

-          Développement du sinus

"  vessie

-          Fusion de la base des canaux déférents

"  urètre du pénis

-          Disparition de la membrane urogénitale

"  gouttière urogénitale

            "  urètre du pénis

 

§  Différenciation du sinus urogénital femelle :

 

-          Résorption des parois accolés (= septa) des cornes utérines

"  corps de l’utérus

-          Formation du tubercule de Müller (tissu conjonctif qui forme la partie distale de l’utérus)

"  col de l’utérus

-          Développement de la cloison entoblastique

"  vagin

-          Élongation du sinus urogénital

"  séparation de l’urètre et du vagin

-          Fermeture du vagin par l’hymen (= membrane cloacale)

 

 

L’origine du vagin est ⅓ à partir de l’utérus et ⅔ à partir du sinus urogénital.

 

Ø  Différenciation des organes génitaux externes :

§  Ébauche indifférenciée :

 

À la 4^ème semaine :

 

La membrane cloacale est bordée d’un bourrelet de mésenchyme.

Il constitue le repli cloacal et l’éminence cloacal.

 

Aux 7 – 8^ème semaines :

 

Il y a :

-          Séparation du cloaque et développement du périnée

 

-          Subdivision des replis cloacaux en :

-          Replis anaux

-          Replis génitaux

 

-          Formation des bourrelets génitaux (labio–scrotal)

 

-          Hypertrophie du tubercule cloacal qui devient le tubercule gaénital

 

 

§  Développement femelle :

 

-          Le tubercule génital se développe en clitoris (ou gland)

-          Le bourrelet génital forme les grandes lèvres

-          Le repli génital forme les petites lèvres

 

Il y a :

-          Disparition de la membrane urogénitale

"  gouttière urogénitale

-          Élongation du sinus urogénital, entraînant la séparation de l’urètre

 

-          Subdivision de la gouttière urogénitale

"  méat urétral et orifice vaginal

 

§  Développement mâle :

 

Il y a :

-          Croissance du tubercule

"  pénis (gland et hampe)

-          Soudure des replis génitaux

"  gouttière urétrale

-          Fermeture de la gouttière

"  raphée     = « point de soudure »

                               "  urètre du pénis

-          Développement et soudure des bourrelets génitaux

"  scrotum     (raphée scrotale = « point de soudure »)

 

Migration testiculaire :

 

Les testicules sont reliés au scrotum par un ligament (le gubernaculum testis)

 

La migration se fait par le raccourcissement du ligament.

 

 

La migration est nécessaire pour une spermatogenèse normale :

   "  La spermatogenèse est non fonctionnelle à 37°C et la température du scrotum est de 35°C

 

La migration est induite par la testostérone.

 

L’absence de migration est pathologique :

-          Cryptorchidie :     les testicules sont en position dorsale

-          Orchidopexie :      il faut un positionnement chirurgical dans le scrotum

 

 

 

La fécondation s’effectue dans l’oviducte.

 

Chez l’homme :

       Jours 1 à 4  :   

Transition dans la trompe

                   Amphimixie des pronucléi

                   Segmentation " stade morulla

 

       Jours 5 et 6 :

                   Blastocyste libre dans l’utérus

                   Éclosion hors de la zone pellucide

 

       Jours 6 et 7 :

                   Fixation du blastocyste (nidation) en 2 étapes :

                               Apposition

                               Pénétration

 

"  Lors du point de contact, il y a une prolifération des cellules du trophoblaste polaire (qu’au niveau du point du contact)

                  

v Développement du blastocyste humain :

 

 

Au 5^ème jour, le blastocyste présente 32 blastomères.

 

Au jour 8 :

       Il y a pénétration :

-          Prolifération du trophoblaste polaire et subdivision en :

-          Syncytiotrophoblaste (tissu multinucléé)

-          Cytotrophoblaste

-          Formation de la cavité amniotique avec la séparation du bouton embryonnaire en :

-          Niveau inférieur :

-          Épiblaste (= ectophylle)

-          Hypoblaste (= entophylle)

-          Niveau supérieur :

-          Épithélium amniotique

Syncytiotrophoblaste

                                                                               Cytotrophoblaste

Cavité amniotique

                                                                               Épithélium amniotique

Épiblaste                                                                   

 Hypoblaste                                                                 Lécithocœle I^AIRE

Du jour 8 au jour 12 :

       Il y a invasion.

 

       Au jour 10 :

                   " Mise en place du mésenchyme lâche (= mésoderme extra–cellulaire)

 

 

v Annexes embryonnaires :

 

À la 2^ème semaine :

 

Le lécithocœle II^AIRE correspond au lécithocœle extra–embryonnaire.

 

Le chorion  =     Cytotrophoblaste

                        + Membrane du cœlome extra–embryonnaire

 

À la 4^ème semaine :

 

Il y a un phénomène de plicature et l’extension du cœlome amniotique qui entraîne du cœlome extra–embryonnaire.

 

À la 8^ème semaine :

 

Le syncytiotrophoblaste devient le placenta. Le cordon ombilical est mis en place par le prolongement de la vésicule vitelline et de l’allantoïde.

 

 

 

Il y aussi la mise en place d’une circulation provisoire.

 

Les cellules du mésenchyme migrent au niveau du pédicule de fixation et deviennent des cellules angiogènes (à l’origine des vaisseaux sanguins)

 

Dans la région antérieure, il y a une ébauche péricardiaque (= matériel cardiogène)

 

Au niveau du splanchnopleure, il y a la formation des ébauches vasculo–sanguines. Il s’agit des îlots de Pander et Wolf.

 

 

v Évolution du trophoblaste :

Exemple du trophoblaste humain.

 

Nidation :

 

Il y a la prolifération des cellules du trophoblaste et différenciation en :

-          Couche interne mince (= cytotrophoblaste)

-          Couche externe et fusion des cellules (= syncytiotrophoblaste)

 

À partir du chorion (= trophoblaste et somatopleure), il y a une différenciation des villosités.

 

Au jour 7 :

"  Installation des villosités I^AIRES

 

 

Somatopleure

                                                                                                     Muqueuse utérine

Cytotrophoblaste

                                                                                                     Capillaire utérin

 

 

Syncytiotrophoblaste

 

 

 

                                          Villosité I^AIRE

 

 

Au jour 12 :

"  Installation des villosités II^AIRES

 

 

 

                                                                                                     Muqueuse utérine

                                                                                                     (au point de contact avec l’œuf)

                                                                                                                 $

                                                                                                     Prolifération cellulaire et

                                                                                                     formation de la décidua

 

 

 

                                          Villosité II^AIRE

 

 

L’apparition de lacunes dans le syncytiotrophoblaste qui vont être infiltrées et irriguées provisoirement par les vaisseaux sanguins (par érosion de ceux–ci)

 

 

 

 

 

      

 

 

 

Du jour 13 au jour 15 :

 

 

 

 

Îlot de Pander et de Wolf

 

 

 

 

 

 

                                          Chambre inter–villeuse vascularisée

 

-          Formation de réseaux de capillaires dans le mésoderme extra–embryonnaire,

 

-          Vascularisation des lacunes par les vaisseaux sanguins maternels.

 

 

 

 

 

Expansion du cytotrophoblaste formant une coque externe.

 

 

 

 

 

 

 

Veine ombilicale    Artère ombilicale

 

Irrigation des villosité choriales

 

 

"  Schéma général pour tous les primates.

 

v Les différents types de placentation :

Ø  Placenta indécidué :

 

Il y a absence d’hémorragie, donc absence d’élimination partielle de la muqueuse utérine (au cours de la mise bas)

 

 

§  Placenta de type épithélio–chorial :

 

Il s’agit d’une simple apposition du chorion à la muqueuse utérine. On parle de placenta diffus (présent chez les pachydermes, cétacés, équidés…)

 

 

    Vaisseau sanguin                      Vaisseau sanguin

 

 

                                                                                                                 Œuf

 

 

       Mésenchyme                                                                      Tissu

extra–embryonnaire                                                              Conjonctif

                                                                                                                                  Placenta

 

                                    Trophoblaste  Épithélium

 

                   Chorion                                             Endomètre

 

§  Placenta de type conjonctivo–chorial :

 

L’épithélium utérin est corrodé (détruit) de façon discontinue. Les faisceaux maternels ne sont pas au contact du trophoblaste. On parle de placenta cotylédonnaire (= à grosses villosités) qui est présent chez les ruminants.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Ø  Placenta décidué :

 

Une partie de la muqueuse utérine (décidua) est éliminée lors de la parturition.

 

§  Placenta de type endothélio–chorial :

 

Il y a :

-          Invagination du trophoblaste,

-          Destruction de l’épithélium utérin et d’une partie du tissu conjonctif.

 

Les vaisseaux maternels intacts. On parle de placenta zonaire (présent chez les carnivores)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

§  Placenta de type hémo–chorial :

 

Il y a :

-          Destruction de la paroi des vaisseaux sanguins maternels,

-          Absence de mélange du sang maternel et du sang fœtal.

 

On parle de placenta discoïdal.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

                                                                  Lacune de sang maternel

 

v Fonctions endocrines du placenta :

 

Placentation		Hormone chorionique (CG)	Progestérone	Oestradiol
Épithélio–choriale Brebis		(+)	(+)	(+/–)
Endothélio–choriale Chatte		(–)	(+)	(–)
Hémo–choriale	Lapine	(–)	(–)	(–)
	Ratte	(–)	(+)	(–)
	Singe	(+)	(+)	(+)
	Humain	(+) hCG	(+)	(+)